我想有个我们的大房子，我们在里面快快乐乐的生活，相亲相爱一辈子...下辈子也要一起，还要养一只狗狗！ 

             我知道房子会有的，狗狗也会有的。
  


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[技术篇]毛细管气相色谱柱知识简介
幸福的小孩 发表于 2006/9/21 10:30:20

通常来说，一根毛细管色谱柱由两部分组成—管身和固定相。管身一般使用熔融二氧化硅或不锈钢作为基本材质；而固定相种类就有许多了。大部分的固定相是液体或胶状的高分子量，具有高热稳定性的聚合物，最常用的是聚硅氧烷（有时误称为硅氧烷）和聚乙二醇，另外还有一类是小的多孔粒子组成的聚合物或沸石(例如氧化铝、分子筛等)。     管身：熔融二氧化硅即高纯度合成石英（以下通称熔融石英)，通常在其表面涂上一层聚酰亚胺做为保护层。涂层后的熔融石英毛细管呈褐色：但是涂层后的毛细管之间的颜色却不尽相同。色谱柱的颜色对于其色谱性能没有什么影响。经过持续的较高温度处理后．聚酰亚胺涂层管的的温度会变得比以前更深：标准的聚酰亚胺涂层管熔融石英管的温度上限为360℃，高温聚酰亚胺涂层管的温度上限为400℃。     熔融石英管的内表面会用一些化学方法进行处理，尽量的减小样品和管壁之间可能存在的相互作用。所用的试剂和处理方法一般是依据将要涂在内壁上的固定相种类来确定的。硅烷硅烷化处理则是最为常用的处理方式，即使用硅烷类的试剂和管壁内表面上的

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[技术篇]石蜡切片免疫组化染色步骤
幸福的小孩 发表于 2006/9/20 17:29:58

1、载玻片的处理：
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[技术篇]immunohistochemical analysis
幸福的小孩 发表于 2006/9/20 17:29:58

CK（pan)角蛋白：用于标识上皮。

CK-light 主要来自腺上皮

CK-hight 主要来自鳞状上皮

EMA 标识上皮

Desmin ：标识间质，如纤维组织，平滑肌，横纹肌

Vimentin 波形蛋白：标识间质如纤维组织，平滑肌，横纹肌

Action-sm （SAM） 标识平滑肌

NSE，S-100， Syn， CgA 标识神经，神经内分泌细胞

NFP 神经纤维蛋白 标识神经

GFAP 胶质细丝酸性蛋白 标识胶质瘤。

LCA 淋巴细胞

CD3，CD45Ro T细胞

CD20，CD5 B细胞

CD79α，κ，λ 浆细胞

CD34 血管内皮，间质瘤，孤立性纤维瘤

CD117(c-Kit) 间质瘤

CD68 组织细胞

CD99 神经内分泌肿瘤，尤纹氏肉瘤，间质瘤

Ki67,PCNA 细胞增殖


[技术篇]免疫组化的价格比ELISA和western如何
幸福的小孩 发表于 2006/9/20 17:21:03

免疫组化和ELISA从实验要求上讲是不同的，前者用于检测细胞或组织中某种蛋白的表达阳性率或强度，后者则主要检测组织或细胞上清液中的蛋白含量，至于两者价格差异不是很大，主要取决于一抗的价格。前两者相较于western而言无论从技术难度与复杂程度都相差很多，但就目前而言western仍然是检测蛋白水平的金指标，因为相较于前两者这种方法所的结果更为可靠。如何取舍要看你的实验目的与要求了！


[技术篇]SP法和SABC法都是亲合组织化学技术(三步法)。
幸福的小孩 发表于 2006/9/20 17:21:03

ABC法：ABC代表的是亲和素－生物素－过氧化物酶复合物。利用抗生物素分别连接生物素标记的第二抗和生物素标记的酶。但是此法注意内源性生物素活性的消除，以减少非特异性的染色。

SP法：是采用生物素标记的第二抗体与链霉菌抗生物素蛋白连接的碱性磷酸酶及底物色素混合液来测定细胞或组织中的抗原。PA是一种金黄色葡萄球菌细胞壁分离的蛋白质，它能与各种动物的IGG的FC段结合，在免疫组化中可作为桥抗体或标记抗体。最大的优点是不受种属的特异性限制。此法还具有染色时间短、灵敏度高、背景染色淡等优点，分子量小，易于穿透组织。

两者本质的区别是：SABC法的“三抗”是SABC复合物即链酶亲和素－生物素－过氧化物酶复合物；而SP法的“三抗”是过氧化物酶直接与链酶亲和素相连的，没有通过生物素的中介连接。

SABC步骤：
切片常规脱蜡、脱水；30％H2O2＋蒸馏水10份混合，室温5－10分钟以灭活内源性酶，蒸馏水洗；将切片浸入0.01M枸橼酸盐（PH6.0），微波炉加热至沸腾后断电，间隔10分钟，反复两次进行热修复抗原；滴加5％BSA封闭液，室温20分钟；滴加一抗，


[技术篇]免疫组化非特异性背景染色及其控制方法
幸福的小孩 发表于 2006/9/20 17:21:03

免疫组化非特异性背景染色及其控制方法

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